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HEPES 缓冲剂在细胞培养中的优势

放大字体  缩小字体 发布日期:2021-01-13 11:14:45  浏览次数:6

HEPES4-羟乙基哌嗪乙磺酸)是一种氢离子缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2。我们在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。它是一种弱酸,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。既然我们常用于细胞培养液中,那它在细胞培养液中有哪些优势呢?

大多数细胞所需pH 7.2-7.4,但细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同,成纤维细胞喜欢较高pH7.4-7.7),而传代转化细胞系则需要偏酸pH7.0-7.4)。HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2-7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值,在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。

利用HCO3 CO2缓冲对的培养液 pH值不稳定,储存一定时间后容易偏碱。如果培养液的 PH变化太快,就可以在培养液中加 HEPES缓冲液至10--25mM的终浓度;它可以长时间保持恒定的PH,为细胞培养者们所喜爱。

HEPES与其他缓冲剂相比,它的分解常数随温度变化不大,这使HEPES缓冲液成为在低温时可较好地保持酶的结构和功能的缓冲液。

但值得我们注意的是,当HEPES暴露于光线中时,会产生H2O2,这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性,因此HEPES作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。

德晟生产的HEPES为白色晶体粉末,主含量≥99.50%,铁离子≤5ppm,硫酸盐≤0.05%,重金属残留(Pb)10ppm。可提供试用样品粉末,自行配置成溶液进行检测使用。

http://www.juvecn.com/hangqing/show-10715.html

特别提示:本信息由相关企业自行提供,真实性未证实,仅供参考。请谨慎采用,风险自负。


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