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吖啶酯类底物在对氧磷酶活性测定中的应用

放大字体  缩小字体 发布日期:2021-04-08 10:27:57  浏览次数:4
核心提示:肿瘤是危及人们生命的"杀手"之一,因此及早的发现和治疗是非常重要的,但由于肿瘤早期的症状不是很明显,容易出现误诊和漏诊等问题。通常在肿瘤发生的4-8周前,

肿瘤是危及人们生命的"杀手"之一,因此及早的发现和治疗是非常重要的,但由于肿瘤早期的症状不是很明显,容易出现误诊和漏诊等问题。通常在肿瘤发生的4-8周前,血清或体液中的对氧磷酶的活性会显著增加或减少,因此,测定体液中的对氧磷酶(PON)的活性是诊断肿瘤的重要手段之一。

测定对氧磷酶活性的方法有多种,但由于干扰因素和灵敏度的问题,能用于体液样品的测定方法却很少。目前文献多以紫外吸收光谱法测定酶的活性,该方法简单,但背景噪音大,并且生物体是一个极其复杂的体系,酶提取液中含有的其它吸光成分较多,紫外-可见分光光度法测定专一性不强,灵敏度也不高。

化学发光法不需要光源,背景噪音小,干扰少,测量时灵敏度高,用于测定酶的活性不需要对具有紫外吸收的于扰物进行分离。在本论文中,合成了三个吖啶酯类底物,以9-4-对氯苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(CPOCMA)为研究对象,采用化学发光法来测定血清中对氧磷酶的活性。

吖啶酯类发光底物的化学发光属于瞬间发光,整个发光过程在20s内即可完成;引发剂可以影响发光强度,当在0.1%H2O20.025mol/LHNO31.0mol/LNaOH1.0×103mol/LCTAB的情况下,吖啶酯类底物的发光强度最大;吖啶酯类底物储存在2℃和25℃时,随着溶液的pH678)的增大,试剂的稳定性变差。

通过对吖啶酯类发光底物性能的研究,将其应用于血清中PON的测定,对底物的特异性、方法的可靠性进行了研究。研究发现吖啶酯类发光底物具有高效的化学发光效率,其浓度比紫外法测定PON活性的底物乙酰苯酯和二嗪农的浓度至少低1.0×10°倍,且用量少,成本低。此外,化学发光法测定PON的活性在生理的pH下就可完成。

 
关键词: 吖啶酯 发光试剂
 
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